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PCR實驗室為什么要分區隔離

返回列表 來源: 發布日期: 2021.03.03

       依據國家法規,在專業的PCR實驗(比如臨床PCR檢驗實驗室)室通常需要做到四區隔離(或至少是三區隔離)的要求。 
    一般常見的三區指的是: 
1、試劑配制區:PCR反應體系的配制區域。 
2、標本處理區:包括擴增模板的制備,也就是我們常常提取DNA的地方;3、PCR擴增和產物分析區:進行PCR擴增的區域,也是擴增產物進行凝膠電泳分析的區域。 

PCR實驗室為什么要分區隔離

    如果將PCR擴增區域和產物分析區細分,那就是典型的四區隔離了。四區隔離,主要目的是防止氣溶膠在各個PCR區域之間的流動,為了避免互相污染,可以針對不同區域設置正負壓的方法: 
1.試劑配制區(Ⅰ區):最潔凈的區域,保持微正壓使得外界空氣無法進入隔離污染源。并且陰性模板應該在此區加入PCR管并蓋蓋,嚴禁在此區域打開、存放裝有DNA模板的離心管;
2.DNA模板添加區(Ⅱ區):保持微負壓,保證內部空氣不外泄,以免陽性模板的氣溶膠對外界環境造成污染。
3.擴增及PCR產物分析區(Ⅲ區):保持微負壓,使得內部空氣不外泄,以免擴增產物的氣溶膠對外界環境造成污染。
    在進入PCR實驗室,需要在操作時遵循Ⅰ區→Ⅱ區→Ⅲ區單一方向進行,不可逆向進行。 不然可能會產生氣溶膠污染,出現假陽性結果!所以PCR實驗室在投入使用之前
,首先要經過國家授權的檢測機構的檢測,并且取得PCR實驗室檢測合格報告,然后徹底消毒以后,才能正常使用。



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